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實(shí)驗(yàn)名稱:雙歧桿菌的超聲波細(xì)胞破碎實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>使用超聲波細(xì)胞破碎儀破碎雙歧桿菌細(xì)胞,以獲得細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)或其他生物大分子。
實(shí)驗(yàn)材料與儀器
雙歧桿菌培養(yǎng)物
超聲波細(xì)胞破碎儀(深那SN-P1200)
冰浴
1.5 mL離心管
移液器及相應(yīng)吸頭
離心機(jī)
PBS緩沖液
實(shí)驗(yàn)步驟
一、準(zhǔn)備工作:
將雙歧桿菌培養(yǎng)物放入離心管中,以8000 rpm離心10分鐘,收集菌體。
棄上清,用PBS緩沖液重懸菌體,重復(fù)洗滌兩次。
二、超聲波破碎:
將重懸后的菌體液置于冰浴中。
將樣品分裝到1.5 mL離心管,每管1 mL。
將超聲波細(xì)胞破碎儀的探頭插入樣品中,確保探頭浸沒在液面以下。
設(shè)置超聲波破碎儀參數(shù):
頻率:20 kHz
功率:400 W
超聲時(shí)間:每次5秒
間隔時(shí)間:5秒
總時(shí)間:8分鐘
在超聲過程中,確保樣品始終保持在冰浴中,以防止樣品過熱。
三、樣品處理
超聲破碎后,將樣品再次以8000 rpm離心10分鐘,收集上清液(破碎后的細(xì)胞裂解液)。
上清液即為破碎后的細(xì)胞內(nèi)容物,可用于后續(xù)的蛋白質(zhì)分析或其他實(shí)驗(yàn)。
結(jié)論
通過超聲波細(xì)胞破碎儀成功破碎了雙歧桿菌細(xì)胞,得到了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì),實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合預(yù)期。